阿原開放式課程One Dollar's Open Courseware: 使用 3M Petrifilm 檢測片測定菌數02

20210802 補充

2021年五月，阿原新增加部份的實驗影片，而且這次使用後製作，把 2014 年原先一個操作步驟，上傳一個影片，可能造成讀者不便。這次結合成一部影片，加上轉場及配樂，文章中還有卡通流程圖及實驗照片與解說文字，歡迎大家前往閱讀

2021年6月26日星期六
20210626 食品中大腸桿菌群檢驗：嬰兒食品 Coliform test of baby food (with 3M Petrifilm coliform Count)

2021年6月22日星期二
20210622 食品過敏原快速檢測：食品中乳品、黃豆、蛋 (Kikkoman Allergeneye) Rapid test of food allergens (milk, soy, and egg)

20210616 食品微生物檢測：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、腸桿菌科 (3M Petrifilm) Rapid Test of Staphylococcus, E. coli, and Enterobacteriaceae

2021年6月7日星期一
20210607 沙門氏菌檢驗（日水 SL 快檢片）Salmonella test ( Nissui Compact Dry SL)

20210530--豬肉及牛肉之萊克多巴胺（瘦肉精）及磺胺藥物 SMT 快檢實驗（台灣尖端快檢片）Rapid test of ractopamine and sulfamethazine in pork/beef (Test strips made by TAIWAN ADVANCE BIO-PHARMACEUTICAL INC)

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2014-01-05 貼出 (持續整理中)

版權沒有，歡迎使用！

課程網頁 Fall 2013 Food Microbiology 食品微生物
下載本次實驗講義 (PDF 或原始檔 ODT)(講義版權沒有，歡迎使用)

使用 3M Petrifilm 檢測片測定菌數
{感謝第四屆學生洪紹華、楊容協助這次實驗器材的準備，及分享操作 3M Petrifilm 的心得}

說明：近年來多家廠商已經推出快檢片，雖然不是衛生福利部公布的檢驗辦法，但是都有經過確效測試 (例如通過審核，成為 AOAC 的方法)

重點：據了解，目前台灣並非所有的食品廠都會進行品管 (____________)，之中會進行生菌數等微生物品管檢驗的，半數以上會用到 3M Petrifilm。阿原希望各位畢業後若要執行的任務時，這樣的實驗經驗會有幫助。因此這次的實驗是暖身，沒有完全按照正規的方法進行。我們預計在下學期的課程中，使用鐵胃，進行市售食品生菌數之檢測，對照衛福部公告的方法 (傳統法)及快篩法，讓大家兩種方法都學會。此外，今年度系上邀請的 HACCP 60B 班的老師也教到快檢片的原理 (阿原提醒______________)，所以這次實驗可以多去了解。
影片：3M Petrifilm Plates Overview (官網之介紹)

(原始影片屬於 3M 所有，因著作權，不方便嵌入到阿原的網頁，因此請讀者自行前往觀看影片)

A. 使用 3M Petrifilm Aerobic Count Plate (Petrilfilm AC) 測定食品生菌數
取部份市售的食品，裝入鐵胃專用袋，加入適量的無菌0.85%食鹽水，在鐵胃中進行拍打，這部份由阿原進行，將會把樣品液體分給每一組。 (提醒，正規的方法是秤 50 g 樣品加入 450 mL 的食鹽水進行拍打，這部份將會在下學期的實驗課，讓每組都可以練習)。
(提醒，為看到檢測片的效果，阿原刻意選擇即將過期的食品，而且在置於室溫，直到各位作實驗，因此不代表該食品真正的生菌數，請不要誤解)

實驗步驟：
1. 請製備稀釋用的試管兩隻
2. 在 Petrifilm 的上方或下方標示樣品、稀釋度、組別。每個稀釋度進行二重複 (與培養皿方式概念相同)
3. 取 1 mL 樣品稀釋液，另一手掀開 Petrifilm 的塑膠膜 (請注意，注入樣品液過程中，不要讓樣品液碰到塑膠膜)
4. 直接放開塑膠膜，不需要慢慢放 (這點與 Petriflm EC 不同)
5. 使用壓板的凹面對準中央施壓，小心移除壓板，靜置1 min後可以進行培養。
6. 35℃, 48 hr 後計算菌落數 (這部份阿原拍照後，01/06計算)
影片：使用 3M Petrifilm EC 測定生菌數 (How to use 3M Petrifilm AC)

B. 使用 3M Petrifilm Coliform Count Plate (Petrilfilm EC) 測定 E. coli K12
為了看到效果，阿原準備了知名的生化實驗菌株，E. coli K12 (非病原)，下個學期的實驗，我們將會測定實際可能帶有大腸桿菌群的樣品。(生菌數與大腸桿菌群的意義及法規衛生標準，將在下個學期的課程說明)

實驗步驟：
1. 前面的步驟與 Petrifilm AC 相同。
2. 加完樣品，請慢慢放開塑膠膜(若直接放開，會有氣泡，將會影響判讀這點與 Petriflm AC 不同，)
3. 使用壓板的平面對準中央施壓，小心移除壓板，靜置 1 min 後可以進行培養。
4. 35℃, 48 hr 後計算菌落數 (這部份阿原拍照後，01/06計算)
影片：使用 3M Petrifilm EC 測定 E. coli K12

圖一實驗流程
根據 Petrifilm 操作手冊，我們應該要在周三上午進行觀察，這部份阿原會來拍照或掃描，等到 01/06 的實驗，再來計算。

實驗結果

因為周一實驗，預計周三中午計算菌落，但剛好遇到放假，於是阿原將各組的圖形，以 600 dpi 掃描，存成 jpg 檔，讓大家自行下載實驗結果照片 (zip 檔, 32.1 Mb)。
(說明：上傳到 Google-Blogger 的照片，若像素過大，解析度會被修正，所以下方的實驗結果照片不是原來阿原掃描的情況，若需要阿原掃描的檔案，還是請下載上述的 zip 檔)